1、技术原理：

RNA干扰（RNA interference, RNAi）是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。由于RNA具有高度的序列专一性和有效的干扰，可以特异将特定基因沉默，从而获得特定基因的功能丧失或者基因表达量降低。因此RNA可作为功能基因组学的一种强有力研究工具。


两个在RNAi途径的基因沉默中具有实质利害关系的是双链小干扰RNA（siRNA）和基于载体的短发夹RNA（shRNA）。虽然siRNA和shRNA都可用于蛋白沉默，但它们的作用机制有所不同。不管是长的双链RNA还是短的约21bp碱基对的双链都能够直接被转运到组织培养的细胞中（参见下图）。长的双链shRNA与Dicer一起形成复合物，双链特异性的核糖核酸酶III能够将它们处理成带有两个游离碱基的长度为21-23nt的siRNA。随后这些siRNA片段与RISC结合，RISC由Argonaute-2 （Ago-2）、Dicer和TAR-RNA-结合蛋白（TRBP）组成。然后RNA的两条链分开，其中一条链从复合物上分离。5'端双链稳定性最低的那条链被选择出来，稳定的并入沉默复合物中。


Exportin-5蛋白转运到细胞质中，在细胞质中它们与Dicer结合去除环状序列。在这一点上，它们与siRNA的加工方式（以短的双链形态导入细胞，然后被Dicer识别）相同。在与RISC结合并去掉其中一条RNA链后，它们识别mRNA占有互补序列，导致其降解。

 

基因沉默载体构建

 

2、技术优势：

① 可以提供各类型基因干扰载体构建服务，表达载体可以高效表达shRNA，并给客户承诺高效的干扰效率；

② RNAi 可特异性的抑制靶基因表达，不仅能灵活组合同时抑制多个靶基因，还可用于大规模的基因筛选，已被广泛用于基因功能研究和基因治疗领域。


3、质量监控：

① 基因序列测序

② 载体酶切鉴定

③ 载体实验报告


4、应用：
功能学，药物靶点筛选，细胞信号传导通路分析，疾病治疗等等。