1、技术原理：

腺相关病毒( adeno-associated virus，AAV) 是一类细小病毒，基因组为单链DNA，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。通常需要腺病毒或疱疹病毒帮助其在体内复制扩增。重组腺相关病毒（recombinant AAV, rAAV）是利用AAV2 型基因组与不同血清型的衣壳蛋白基因组结合产生的混合体病毒载体，可将目的基因的CDS 区序列或者RNAi 干扰序列插入rAAV 表达质粒中，包装病毒后感染细胞完成对目的基因的操作。在人类和小鼠中，AAV 感染可以介导外源基因发生低频率（不高于2%）的定向整合，插入的位置一般在19 号染色体短臂（人类基因组中的AAV S1 和鼠中的ROSA26 位点）。病毒基因组在不发生整合的情况下在被感染细胞内形成伴随体。腺相关病毒广泛应用在神经领域、心血管领域、肝脏、肌肉、肺、及其他领域，其主要的应用方向在于定位注射和整体注射。


我们提供的腺相关病毒颗粒经过超速离心纯化，并通过qPCR对病毒基因拷贝进行滴定。腺相关病毒的滴度在10^12~10^13v.g. /ml，完全可以满足各类整体实验的使用要求。


研究发现 AAV 具有多种血清型，各种不同血清型的 AAV 载体的主要区别是衣壳蛋白不同，因此对不同的组织和细胞的转染效率存在差异。我们在包装腺相关病毒时有 12种不同的 AAV 血清型可供客户选择，建议客户针对不同组织器官选择相应血清型的 AAV 病毒。


血清型 简介
1 顺行示踪跨单突触。适合神经等方向的研究
2 胞外吸附分子为硫酸乙烯肝素蛋白多糖，适合于神经等方向的研究
5 胞外吸附分子为N-唾液酸，适合肺、眼睛、神经等
6 适合血液细胞，比如T细胞
8 使用肝脏，受体为LamR
9 最广谱的血清型，感染全身效果极好，可以穿过血脑屏障、胎盘屏障
DJ 适合体外实验、细胞
DJ/8
 适合肝脏，眼，中枢神经，肌肉
PHP.eB 基于PHP.B，加强版，更适合中枢神经系统
PHP.B
 在神经元和神经胶质中感染效率超高，大约是9型的40倍。
PHP.S
 能够感染外周神经元
Retro 逆向标记血清型





1 2 5 6 8 9 DJ Retro PHP.eB PHP.S
心脏 √

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肝脏
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肺

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胰腺

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骨骼肌 √
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神经 √
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眼部
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2、我们可以提供的服务如下：

① 基因过表达腺相关病毒服务

② 基因干扰腺相关病毒服务

③ MicroRNA研究腺相关病毒服务

 

3、AAV相比于其他病毒载体的优势：

① 表达时间长：绝大多数重组rAAV 不会整合到基因组上，而是在宿主细胞中串联形成附加体（episome）存在于细胞核中，细胞在细胞复制和分裂后会丢失附加体，并因此失去基因表达能力，rAAV在细胞分裂不旺盛的组织中可持续表达6个月以上。

② 扩散性强：rAAV 的体积小，滴度高，因此具有远高于腺病毒和慢病毒的扩散性，可以穿透血脑屏障，是理想的神经元和胶质细胞感染工具。

③ 特异性强：rAAV 有十数种常用的血清型，不同的血清型对不同的脏器有较高的识别及感染能力，是动物实验首选。

④ 免疫原性低：当AAV 用局部大剂量感染肌肉、脑、眼等组织时，不易造成免疫反应。

⑤ 安全性高：目前还没有发现AAV 对人体致病，是美国FDA 批准的可以直接用于人体基因治疗的最安全的病毒载体

⑥ 高稳定性：rAAV 病毒在4℃可以保存1 周，并且对氯仿等试剂具有抗性。