腺病毒包装

1、技术原理：

重组腺病毒（AdV）是人血清5型腺病毒（Ad5），一种复制缺陷的腺病毒载体系统，在基因治疗、基础生命科学研究等领域被广泛应用。腺病毒缺失了早期表达基因序列E1和E3区。E1是腺病毒复制所必须的，E1的缺失使其不能自身复制，只能依靠包装细胞如293A细胞提供的反式互补进行复制扩增，以此保证腺病毒的安全性。E3基因表达的蛋白能对抗宿主的抗病毒防御系统，E3区的去除能减少宿主的体液免疫反应。

腺病毒（Adenovirus）是一种线性双链DNA无包膜病毒，对分裂期细胞和非分裂期细胞均具有感染能力，且具有嗜上皮细胞性。重组腺病毒载体是以腺病毒为基础发展起来的工具病毒载体，它可通过受体介导的内吞作用进入细胞内，但腺病毒基因组不整合进入宿主细胞基因组中。腺病毒作为一种常用的基因操作工具，在心血管领域、肝脏、肌肉、肺、肿瘤及其他领域广泛应用。

2、技术优势：

腺病毒与其他病毒工具比较，具有以下优势：

① 宿主范围广：腺病毒可感染分裂和非分裂细胞，并且感染后24-48小时即可表达，是研究原代非增殖细胞基因表达的最佳系统。

② 滴度高：腺病毒系统在转有 E1 基因的 293A 细胞中可进行自我复制，可产生滴度为10¹⁰~10¹¹pfu/ml的病毒。

③ 载体容量大： 可容纳不超过5kb 的片段。

④ 不整合到染色体中，无插入致突变性：腺病毒除卵细胞以外，几乎在所有已知细胞中都不整合到染色体中，因此避免了因整合而引发的潜在的基因突变和随机效应 。

3、质量控制：

① 基因序列测序

② 载体酶切鉴定

③ 超速梯度离心和过滤，并通过壳蛋白免疫法进行滴度测定

④ 一般情况下，腺病毒的滴度在10¹⁰~10¹¹pfu/ml

4、应用：

细胞感染：腺病毒可有效感染肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、神经元细胞、干细胞等多种类型的细胞；在心血管领域、肝脏、肌肉、肺、肿瘤及其他领域广泛应用。

体内注射：心脏、肝脏、肺、胰腺、神经系统

※我们所提供的腺病毒颗粒经过超速梯度离心和过滤，并通过壳蛋白免疫法进行滴度测定。腺病毒的滴度在10^10~10^12pfu/ml，完全可以满足各类实验的使用要求。我们可以提供的服务如下：

① 基因过表达腺病毒服务

② 基因干扰腺病毒服务

③ MicroRNA研究腺病毒服务